缓冲液的选择缓冲液离子应不影响被分离物质的活性并不干扰其测定,钢衬PO离子交换柱哪家好,不影响样品的溶解度和稳定性。如洗脱液要用280 nm波长检测时,缓冲液内就不能有芳香族化合物;如要用215~225 nm波长检测肽键的含量,则不能用含羧基的缓冲液。采用阳离子交换剂时,应选用阴离子型缓冲液,如磷酸、醋酸缓冲液等。采用阴离子交换剂时,钢衬PO离子交换柱零售,应选用阳离子型缓冲液,如Tris、吡1啶缓冲液等。
离子交换层析的基本原理:
离子交换层析是通过带电的溶质分子与离子交换层析介质中可交换离子进行交换而达到分离纯化的方法,也可以认为是蛋白质分子中带电的氨基酸与带相反电荷的介质的骨架相互作用而达到分离纯化的方法。 离子交换层析法主要依赖电荷间的相互作用,利用带电分子中电荷的微小差异而进行分离,具有较高的分离容量。几乎所有的生物大分子都是极性的,都可使其带电,钢衬PO离子交换柱,所以离子交换层析法已广泛用于生物大分子的分离、中等纯化及精制的各个步骤中。
由于离子交换层析法分辨率高,工作容量大,钢衬PO离子交换柱推荐,并容易操作,因此它不但在医药、化工、食品等领域成为独立的操作单元,也已成为蛋白质、多肽、核酸及大部分发酵产物分离纯化的一种重要的方法。目前,在生化分离中约有75%的工艺采用离子交换层析法。
离子交换柱层析分离蛋白原理详解
离子交换与洗脱
所谓离子交换,是指溶液中的某一种离子与另一种靠静电力结合在惰性载体上的离子进行可逆交换的过程,即溶液中的离子结合到载体上而载体上的离子被替换下来。若惰性载体上以共价键结合着带正电荷的活性基团,则可交换阴离子,叫阴离子交换剂;若以共价键结合着带负电荷的活性基团,则可交换阳离子,叫阳离子交换剂。在一定的条件下,混合物中不同蛋白质所带电荷的性质及电荷多少不同,有的能与特定离子交换剂结合,有的不能结合;能与离子交换剂结合的蛋白质中,结合力的大小也不一定相同,所以,采用适当的洗脱条件,可以对它们进行有效的分离。