洗脱液中离子种类不同时,取代能力不一样。改变缓冲液的pH时,蛋白质分子的解离度降低,电荷减少,从而减弱其与交换剂的结合力。应用阴离子交换剂时要降低pH;应用阳离子交换剂时要升高pH。有时,苏州钢衬四氟离子交换柱,同时改变两个方面的条件,有利于分离复杂的蛋白质混合物。在恒定的洗脱条件下,往往难以将复杂的蛋白质混合样品有效地分离。通常采用不断改变洗脱条件的方法,即用梯度洗脱的方法来分离蛋白质混合样品。
虽然离子交换层析法分离蛋白质时,主要通过离子交换的作用,但实际上也可能存在 一些疏水吸附和分子筛作用。
离子交换葡聚糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶具有许多优点:不会引起被分离物质的变性或失活;非特异性吸附很低;交换容量大(为离子交换纤维素的3~4倍);容易制成微球型,因此装柱和层析时的流速都较易控制。它的缺点是随着洗脱液的离子强度和pH的变化,床体积变化大,明显影响流速;另外,钢衬四氟离子交换柱价格,由于它的凝胶性质,有时会把大分子物质排阻在网络结构之外。
ProMoST网络工具。翻译后修饰(PTM)对蛋白的pI具有显着影响。大多数PTM发生在可电离侧链上,一些PTM如磷酸化或乙酰化引入新的可离子化的化学基团。如果您正在纯化可能进行翻译后修饰的真核生物蛋白,钢衬四氟离子交换柱零售,请使用ProMoST工具来计算和比较翻译后修饰对pI,分子质量和其他物理化学性质的影响。
记住,理论pI可能不同于真实的等电点,钢衬四氟离子交换柱厂,并且可能不反映蛋白表面上的实际电荷分布。电荷分布不均匀,并且一种蛋白在表面上既有正电荷,又有负电荷。当研究新的蛋白时,我总是筛选一系列阳离子和阴离子交换剂,弱和强,以优化纯化步骤。